부제: HPLC의 구성과 각각의 기능
안녕하세유
케미걸임니다
HPLC를 배운지 얼마 되지 않았기에
저도 복습하는 마음으로, 까먹지 않기 위해서 이 글을 씁니다
잘못된 부분에 대한 지적,추가적인 정보는 달게 받겠습니다
바로 본론 들어가겠슴다
HPLC를 초초간단하게 그리면 총 6개의 유닛으로 나눌 수 있습니다.
기기 자체에 해당하는 구성들은 왼쪽에 놓여져 있습니다.
실제로 크로마토그램이 나오고, 데이터 처리를 하는 PC를 넣었습니다.
이동상부터 하나씩 설명하겠습니다.
1. 이동상
이동상은 펌프를 지나 샘플을 흘려서 칼럼을 지나게끔 해주는 역할을 합니다.
이동상의 극성에 따라서 역상과 순상으로 나뉠 수 있습니다.
역상은 이동상이 극성용매로 구성되어 있고, 칼럼은 무극성의 재질로 채워져 있을 때를 의미합니다.
순상은 이동상이 무극성용매로 구성되어 있고, 칼럼은 극성의 재질로 채워져 있을 때를 의미합니다.
2. 펌프
이동상이 일정한 유속으로 흘러갈 수 있게끔 도와주는 역할을 합니다. 또한 이동상이 2개 이상 쓰이는 Gradient mode일 때, 용매의 비율을 조정합니다. 유속이 일정하지 않거나 압력에 문제가 있으면 검출 시 문제를 일으킬 수 있습니다.
3. 오토샘플러
오토샘플러는 전처리를 한 샘플을 자동으로 주입시켜주는 장치를 말합니다. 샘플vial을 트레이에 넣고 프로그램을 입력하면 해당되는 바이알에 주사기(실린지)가 꽂히고 자동으로 주입해줍니다.
4. 칼럼 및 오븐
샘플이 칼럼을 지나면서 성분의 분리가 일어나게 됩니다. 앞서 말했듯 칼럼은 극성 칼럼, 무극성 칼럼이 있고, 시험항목에 따라서 수많은 종류의 칼럼을 사용합니다. 칼럼은 자체길이와 칼럼 충진재의 크기, 종류에 따라서 크로마토그램에 많은 변화를 줄 수 있습니다. (칼럼편만 따로 만들어볼까봐요!)
오븐은 칼럼을 일정 온도로 유지시켜주는 역할을 합니다.
5. 검출기
검출기는 샘플이 칼럼을 지나면서 성분의 분리가 일어나는것을 감지합니다. 검출기도 종류가 많은데요. 대표적으로는 UV 검출기가 있습니다! 저는 UV만 써봤어요...껄껄~
6. 데이터처리(PC)
크로마토그래피의 분석을 하는 곳입니다. 프로그램에서 적분조건을 바꿔줄 수 있고, 피크별 네이밍도 가능합니다. 저는 적분이 제일 까다로운데요. 적분조건에 따라서 결과가 부적합할 수도 있기 때문입니다. 그 예시로는 면적백분율로 계산한 함량이 있습니다. 또한 내가 원하는 항목도 불러 올 수 있습니다. 예를 들어, 이론단수, 분리능, 대칭계수 등이 있습니다. 규격과 시험기준에서 요구하는 항목들을 선택하면 결과를 인쇄 할 수 있습니다.
오늘은 여기까지할게요!
다음편은 각 유닛을 다룰 때 주의해야 할 점에 대해 다뤄보겠습니다. 감사합니다~~~
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